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第一部分 理论知识1

第一章 绪论3

第一节 工业微生物3

第二节 工业微生物育种技术4

一、自然选育（选择育种）4

二、诱变育种5

三、代谢控制育种5

四、杂交育种5

五、基因工程育种6

本章小结6

复习思考题6

第二章 微生物育种的遗传基础7

第一节 细胞分裂及遗传学意义7

一、有丝分裂7

二、减数分裂9

三、微生物的繁殖方式12

第二节 微生物的遗传物质16

一、核基因16

二、核外基因17

第三节 基因突变18

一、基因突变的类型18

二、基因突变的修复19

三、突变体的形成22

第四节 微生物的基因重组22

一、原核微生物的基因重组22

二、真核微生物的基因重组26

本章小结27

复习思考题27

第三章 工业微生物育种出发菌株的分离与筛选28

第一节 育种出发菌株的选择29

一、育种出发菌株的特性29

二、育种出发菌株的来源29

第二节 微生物样品的采集30

一、采样30

二、富集培养34

第三节 纯种分离37

一、好氧微生物的分离37

二、厌氧微生物的分离45

第四节 出发菌株的筛选和产物活性的测定47

一、出发菌株的筛选47

二、产物活性的测定49

本章小结50

复习思考题51

第四章 工业微生物诱变育种52

第一节 工业微生物育种诱变剂52

一、物理诱变剂52

二、化学诱变剂57

三、生物诱变剂64

第二节 诱变育种的步骤与方法65

一、诱变出发菌株的选择与纯化65

二、单细胞（或单孢子）悬液的制备67

三、诱变剂及诱变剂量的选择69

四、诱变剂的处理方式与方法72

五、影响诱变效果的因素74

第三节 典型诱变菌株的筛选76

一、营养缺陷型菌株的筛选76

二、温敏突变株的筛选81

三、抗噬菌体菌株的选育83

本章小结86

复习思考题87

第五章 工业微生物代谢控制育种88

第一节 微生物的代谢及产物88

一、初级代谢及其产物89

二、次级代谢及其产物89

三、初级代谢与次级代谢的关系91

第二节 初级代谢的调控92

一、酶合成的调节92

二、酶活性的调节97

三、反馈抑制与反馈阻遏的比较100

第三节 次级代谢的调控100

一、碳源分解调节101

二、氮源分解调节101

三、磷酸盐调节102

四、代谢产物反馈调节102

五、细胞膜透性调节103

第四节 代谢控制育种104

一、组成型突变株的选育104

二、抗分解调节突变株的选育105

三、抗反馈调节突变株的选育109

四、细胞膜透性突变株的选育113

五、营养缺陷型在代谢调节育种中的应用115

六、渗漏缺陷型在代谢调节育种中的应用116

本章小结117

复习思考题118

第六章 工业微生物杂交育种119

第一节 微生物杂交育种119

一、微生物杂交育种的意义119

二、微生物杂交育种的一般程序120

三、微生物杂交育种方法121

第二节 细菌杂交育种122

一、细菌杂交的特点122

二、细菌杂交育种的方法122

第三节 放线菌杂交育种123

一、放线菌杂交的特点124

二、放线菌杂交育种的方法125

第四节 酵母菌杂交育种129

一、酵母菌杂交的特点129

第五节 霉菌杂交育种132

一、霉菌杂交的特点132

二、霉菌杂交育种的方法133

第六节 原生质体育种138

一、原生质体再生育种139

二、原生质体诱变育种140

三、原生质体转化育种143

四、原生质体融合育种146

本章小结156

复习思考题157

第七章 基因工程育种158

第一节 基因工程简介158

一、基因工程的特点158

二、基因工程中常用的工具酶159

三、基因工程中常用的载体160

第二节 基因工程育种162

一、目的基因的获取162

二、载体的制备164

三、目的基因与载体DNA的体外重组165

四、重组DNA导入受体细胞166

五、重组菌的筛选、鉴定与分析167

第三节 基因工程育种的应用169

一、在工业上的应用169

二、在医学上的应用170

三、在农业上的应用171

本章小结173

复习思考题174

第八章 菌种保藏175

第一节 菌种的退化及防止措施175

一、菌种退化的现象175

二、菌种退化的原因176

三、防止菌种退化的措施177

第二节 菌种保藏方法178

一、斜面低温保藏法178

二、普通冷冻保藏法179

三、超低温冷冻保藏法179

四、液氮超低温保藏法179

五、沙土管保藏法180

六、冷冻真空干燥保藏法181

七、液体石蜡保藏法182

本章小结183

复习思考题184

第二部分 实训操作185

实训一 培养基的配制及灭菌187

1牛肉膏蛋白胨培养基和高氏1号培养基187

2马丁（链霉素、孟加拉红、去氧胆酸钠）培养基和豆芽汁葡萄糖培养基188

实训二 微生物采样、富集和分离纯化190

1土壤微生物的采样190

2土壤微生物的富集培养（淤泥红螺菌）191

3土壤微生物的分离纯化（细菌、放线菌、酵母菌、霉菌）192

实训三 紫外线诱变育种196

1出发菌株的分离纯化196

2紫外线诱变剂量的选择与诱变育种198

3高产突变株的初筛201

4高产突变株的复筛202

实训四 基因工程育种操作205

1少量质粒DNA的提取和鉴定205

2 PCR扩增制备目的基因209

3大肠杆菌感受态细胞的制备和转化211

4重组菌的筛选、鉴定与分析213

实训五 菌种保藏217

参考文献219